我们目前提供的RNA建库测序服务有：
- RNA转录组建库测序（polyA选择）
- RNA转录组建库测序（rRNA去除）
- 链特异RNA建库测序
- Small RNA建库测序
Total RNA样本中核糖体RNA (rRNA)序列高达90%，mRNA通常只占Total RNA的1 - 2%，可通过 poly-T oligos磁珠富集mRNA，或rRNA-depletion方法去除rRNA，这样可以获取更高比例的编码蛋白序列和长非编码序列信息。富集后的RNA经片段化，反转录并扩增为双链cDNA，末端修复后末端加‘A’，再连接Adapter/Index，最后进行PCR扩增和片段筛选，经纯化后完成文库构建。我们会对文库进行QC，符合要求的文库方可上机测序。建库流程整体类似，不同文库类型在建库细节方面可能会有所不同。
提交符合要求的样品是文库构建成功和获得高质量测序数据的关键，因此请确保您的样品符合纯度、浓度要求。如因样品问题而建库失败将影响您样品的实验进度。
如果您需要二代RNA建库测序服务，请确定您的样品：
- 我们只接收纯化提取好的RNA样品，请客户自行完成RNA提取等处理工作。
- 所有样品须有NanoDrop OD 260/280值和260/230值、Qubit浓度定量。接收的RNA样品会在安捷伦5200 Fragment Analyzer上进行RNA质检：Total RNA样品检测完整度（RQN值）；其他RNA样品检测核酸大小。质检不通过（RQN值小于7或降解、DNA污染等情况）的样品将被退回。
- 所有RNA样品都须DNA-free (可在胶图中检查是否有DNA污染)，溶于RNase-free洗脱液，置于1.5ml低吸附离心管中用封口膜封好，用记号笔或标签清晰、准确地标记样品编号，内容应与《样品信息单》一致。
- 请在《样品信息单》中准确填写样品浓度、体积、建库类型等信息。
- Total RNA建库最低起始量100ng，体积最少15μl；其他RNA样品最低起始量10ng，体积最少10μl。
核酸定量均以Qubit定量为准，如为NanoDrop定量，则需按两倍量提交。样本起始量越高，越有利于提高文库的多样性，在条件允许情况下，请尽量多提交样本。Total RNA应完整性良好，无蛋白质，无肉眼可见的杂质污染，琼脂糖凝胶图中，应有清晰的 18S、28S 条带，Bioanalyzer 2100或Fragment Analyzer 5200质检，RQN值应大于7，小于7的降解样品建库会影响文库的多样性甚至建库失败。RNA的NanoDrop OD 260/280比值应在1.8和2.1之间，260/230比值应高于1.5。
样品如需长期保存，请置于-80℃低温冷冻箱内。为防止样品降解对测序产生影响，我们接受的 RNA 样品冻存时间建议不超过一个月。运输中请使用足量的干冰，并选用较快的运输方式，以降低运输过程中样品降解的可能性。
